ICS
07.140
CCS
C06 SF
中華人民共和國司法行政行業(yè)標(biāo)準
SF/T 0173—2024
代替 SF/Z JD0107010—2011
血液中碳氧血紅蛋白飽和度的雙波長分光光度檢驗方法
Determination of carboxyhemoglobin saturation in blood by dual-wavelength spectrophotometric method
2024 - 12 - 30發(fā)布
2025 - 06 - 01實施
中華人民共和國司法部 發(fā)布
SF/T 0173—2024
I
目次
前言 ................................................................................. II
1 范圍 ............................................................................... 1
2 規(guī)范性引用文件 ..................................................................... 1
3 術(shù)語和定義 ......................................................................... 1
4 原理 ............................................................................... 1
5 試劑、儀器和設(shè)備 ................................................................... 1
6 操作方法 ........................................................................... 1
7 分析結(jié)果評價 ....................................................................... 2
附錄A（資料性） 波長的選擇及毒理學(xué)數(shù)據(jù) ............................................... 3
SF/T 0173—2024
II
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《標(biāo)準化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
本文件代替SF/Z JD0107010—2011《血液中碳氧血紅蛋白飽和度的測定 分光光度法》，與SF/Z JD0107010—2011相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：
——
增加了“波長的選擇”的詳細內(nèi)容（見附錄A）。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。
本文件由司法鑒定科學(xué)研究院提出。
本文件由司法部信息中心歸口。
本文件起草單位：司法鑒定科學(xué)研究院、浙江省公安廳物證鑒定中心、復(fù)旦大學(xué)。
本文件主要起草人：劉偉、嚴慧、王鑫、傅得鋒、姜宴、卓先義、向平、鄧虹霄、沈保華、吳何堅。
本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：
——
2011年首次發(fā)布為SF/Z JD0107010—2011；
——
本次為第一次修訂。
SF/T 0173—2024
1
血液中碳氧血紅蛋白飽和度的雙波長分光光度檢驗方法
1 范圍
本文件描述了血液中碳氧血紅蛋白飽和度的雙波長分光光度檢驗方法，包括原理，試劑、儀器和設(shè)備，操作方法以及分析結(jié)果評價。
本文件適用于血液中碳氧血紅蛋白飽和度的定量分析。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
GA/T 122 毒物分析名詞術(shù)語
3 術(shù)語和定義
GA/T 122界定的術(shù)語和定義適用于本文件。
4 原理
在一定波長下，碳氧血紅蛋白飽和度與其吸光度成正比。利用雙波長法，從空白血液和碳氧血紅蛋白飽和血液的體系中選擇兩對等吸收點（本方法中選擇波長λ1＝530 nm、λ2＝583 nm和λ3＝569 nm，組成兩對等吸收點，以有效消除干擾，減少誤差），通過檢材樣品和碳氧血紅蛋白飽和的檢材樣品的兩對等吸收點的吸收度差值，以其比值求得碳氧血紅蛋白飽和度。
注：
波長的選擇及毒理學(xué)數(shù)據(jù)見附錄A。
5 試劑、儀器和設(shè)備 試劑
試驗用水應(yīng)為符合GB/T 6682規(guī)定的一級水。所用試劑及要求如下。
a)
一氧化碳氣體：市售一氧化碳氣瓶內(nèi)氣體。
b)
稀釋液：取0.05 mL的25%氨水加水稀釋至100 mL。 儀器和設(shè)備
儀器和設(shè)備及要求如下。
a)
紫外/可見分光光度計：波長范圍應(yīng)包括500 nm～600 nm。
b)
比色皿。
c)
移液器。
6 操作方法 檢材樣品測定
SF/T 0173—2024
2
吸取檢材樣品血液100 μL，用稀釋液10 mL稀釋，以稀釋液為參比，測其在λ1＝530 nm、λ2＝583 nm
和λ3＝569 nm的吸收值，然后將此檢材樣品溶液通一氧化碳氣體約15 min至飽和，氣泡以1個/s～2個/s
為宜，測定碳氧血紅蛋白飽和的檢材樣品溶液在λ1＝530 nm、λ2＝583 nm和λ3＝569 nm的吸收值。
記錄與計算
記錄檢材樣品血液在λ1＝530 nm、λ2＝583 nm和λ3＝569 nm的吸收值，再記錄碳氧血紅蛋白飽和的
檢材樣品溶液在λ1＝530 nm、λ2＝583 nm和λ3＝569 nm的吸收值，血液中碳氧血紅蛋白飽和度按式（1）
計算。
2 100
ΔA
ΔA
A
A
2
2
1
1
+ ?
?
?
= ( ) /
′ ′
C % ………………………………… （1）
式中：
C ——檢材樣品中碳氧血紅蛋白飽和度；
ΔA1 ——檢材樣品在波長530 nm和波長583 nm處的吸收值差值；
ΔA2 ——檢材樣品在波長569 nm和波長583 nm處的吸收值差值；
ΔA1′——碳氧血紅蛋白飽和的檢材樣品在波長530 nm和波長583 nm處的吸收值差值；
ΔA2′——碳氧血紅蛋白飽和的檢材樣品在波長569 nm和波長583 nm處的吸收值差值。
計算相對相差
檢材樣品平行測定兩份，相對相差按式（2）計算。
RD ＝ 100 1 2 ?
?
C
C C
% ………………………………………（2）
式中：
RD ——相對相差；
C1、C2——兩份檢材樣品平行測定的結(jié)果；
C
——
——兩份檢材樣品平行測定結(jié)果的平均值（C1+C2）/2。
7 分析結(jié)果評價
兩份檢材樣品中碳氧血紅蛋白飽和度的相對相差不超過20%（腐敗檢材不超過30%）時，結(jié)果按兩份
檢材樣品中碳氧血紅蛋白飽和度的平均值計算，否則應(yīng)重新測定。
SF/T 0173—2024
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A
A
附錄A （資料性） 波長的選擇及毒理學(xué)數(shù)據(jù)
A.1 波長的選擇
雙波長法是利用空白血液（碳氧血紅蛋白飽和度為0%，血紅蛋白以氧合血紅蛋白形式存在）和碳氧血紅蛋白飽和血液（碳氧血紅蛋白飽和度為100%，血紅蛋白以碳氧血紅蛋白形式存在）進行光譜掃描，在氧合血紅蛋白吸收峰上選擇兩個等吸收點（見圖A.1），且這兩個波長處碳氧血紅蛋白的吸收值差值ΔA較大，則ΔA僅與碳氧血紅蛋白含量相關(guān)。在500 nm～600 nm的波長區(qū)域內(nèi)，碳氧血紅蛋白和氧合血紅蛋白的吸收峰都是雙峰。對空白血液和碳氧血紅蛋白飽和血液分別進行光譜掃描，空白血液在λ1＝530 nm、λ2＝583 nm和λ3＝569 nm吸收值相等，而碳氧血紅蛋白飽和血液在λ1＝530 nm和λ3＝569 nm的吸收值均與λ2＝583 nm處的吸收值相差較大（其中λ3＝569 nm為最大吸收波長之一，與λ2＝583 nm處吸收值的差值也最大），因此可組成λ1＝530 nm和λ2＝583 nm、λ3＝569 nm和λ2＝583 nm兩對等吸收點進行雙波長檢測，從而消除干擾，減少誤差。
圖
A.1 波長選擇示意圖
A.2 毒理學(xué)數(shù)據(jù)
正常吸煙者血液中碳氧血紅蛋白飽和度可達5%～15%。
